|
Le système vecteur d'expression baculovirus (BEVS) est universellement reconnue comme un outil puisant et polyvalent pour la production des grandes quantités de protéines recombinantes en raison de sa facilité d'utilisation, son haut niveau d'expression, et sa capacité d'incorporer des modifications post-translationnelles. Le paquet de service d’expression baculovirus de GenScript comprend à la fois la production du virus et la production à grande échelle des protéines, convenable pour les industries pharmaceutiques, les biotechs et les établissements universitaires. GenScript a mis au point des méthodes pour la sécrétion des protéines recombinantes à partir des cellules d'insectes infectées par des baculovirus. Nous pouvons produire des quantités de protéines recombinantes à échelle milligramme, appropriées pour le criblage et les tests biologiques en utilisant soit les procédés de purification du client, soit nos propres procédés. Nos services flexibles ont la capacité de production à grande échelle: Nous pouvons produire jusqu'à 500 litres par projet.
Les spécialistes d'expression de protéines de GenScript travaillent en étroite collaboration avec les clients pour cloner et exprimer des protéines recombinantes de pleine longueur à partir des ADNc de pleine longueur, des informations sur les séquences EST et les séquences génomiques, fournissant des services et de l’expertise à tous les stades de l'expression et de la production des protéines.
Avantages de l’Expression Baculovirus:
- Clonage du gène (avec ou sans tag d’affinité) dans un vecteur d’expression commercialement disponible ou un vecteur personnalisé
- Production des virus recombinants en utilisant le système Bac-à-Bac
- Extraction de l’ADN viral
- Amplification et titration de virus recombinant à haut titre
- Optimisation de l’expression du gène étranger et production de protéines
- Augmentation de l’échelle de production des inoculums du virus et des protéines en suspension (wave mixer; jusqu'à 100L, culture agite; jusqu'à 10L)
- Expression marquée aux 15N- ou 13C
Spécification de Service:
| Services | Description | Livraison |
| I. Génération de l’ADN du bacmide recombinant |
- Amplification/isolation du gène ou du gène synthétique d’intérêt dans un vecteur d’expression baculoviral
- Transformation du clone d’expression en cellules DH10Bac
- Isolation de l’ADN du bacmide recombinant
|
- Vecteur d’expression avec insère (5µg)
- Fichier de séquence vérifiée
- Stock glycérol avec vecteur
- Documentation des procédures
|
| II.Génération d’un stock viral à faible titre |
- Transfection des cellules d’insecte (Sf9,Sf21,Hi5) avec l’ADN du bacmide recombinant
- Testage de l’expression de la protéine recombinante par western blot
|
- Données d’expression
- Stock de virus BV, purifié sur plaque, avec titre
- Documentions des conditions d’expression et analyse
|
| III. Amplification de baculovirus recombinant et génération d’un stock viral à haut titre |
- Génération d’un stock viral à haut titre de 10-200 ml à partir du stock à faible titre d’un recombinant unique
- Détermination du titre viral par qPCR
- Confirmation du titre viral par dosage en plaque
|
| IV. Expression de protéines à grande échelle |
- Infection des cellules d’insecte avec des stocks de virus à haut titre
- Récolte post-translationelle des cellules d’insecte et de surnageante
|
- Boulette de cellule
- Données d’expression
|
| V. Purification de protéines |
- Purification de protéine en utilisant Hisx6-tag ou GST-tag, MBP-tag, DYKDDDDK-tag sous des conditions natives ou de dénaturation
- Identification de la protéine purifiée par western blot
- Dialyse
|
- Protéines purifiées
- Données de CQ
- Documentation des procédures
|
| VI. Autres |
- Déménagement de des tags par échange d’ion, chromatographie, filtration sur gel, ou FPLC en phase inverse
|
- Protéines sans étiquette
- Documentation des procédures
|
Devis et Commande:
 Pour demander un devis, s’il vous plait, téléchargez et remplissez notre formulaire de Devis/Commande, et envoyez-le nous par email ou fax.
Pour commander, s’il vous plait, téléchargez et remplissez notre formulaire de Devis/Commande et envoyez-le nous par email ou par fax avec un bon de commande formel ou par carte de crédit. Vous pouvez également soumettre ces infos (bon de commande ou carte de crédit) par téléphone ou via notre serveur web serveur web sécurisé.
En cas de soumission des échantillons, s’il vous plait, joignez les à une copie imprimée et remplie du formulaire de Devis/Commande et envoyez les ensembles à: Protein Services, GenScript, 860 Centennial Ave., Suite 105, Piscataway, NJ 08854, US.
Pour des questions ou pour en savoir sur l’état d’avancement de votre projet, contacter nous par email, téléphone, fax ou via notre serveur web sécurisé.
Nos représentants du service client sont disponibles 24H/24 du lundi au vendredi pour vous aider.
 |
Consultation et Commande par Email : order@genscript.fr
|
 |
Téléphones : 1-732-885-9188 (USA), 32-27-470-921 (Belgique)
Numéros Verts : 08-05-10-22-28 (France), 0800-369-254 (Suisse) |
 |
Fax : 1-732-210-0262, 1-732-885-5878 |
|
