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Baculovirus-Expressionssystem
( Baculovirus Expression System )

Baculovirus-Expression-Vektor-System (BEVS) wird als ein kraftvolles und vielseitiges Werkzeug für große Produktion von rekombinanten Proteinen allgemein anerkannt, wegen der einfachen Durchführung, hohes Expressionsniveaus, und Fähigkeit zur Vereinigung von posttranlationalen Modifikationen. GenScripts Baculovirus-Expression-Service-Paket beinhaltet entweder Virusproduktion als auch großmaßstäbliche Proteinproduktion, die für pharmazeutische und biotechnologische Industrie und akademische Institutionen geeignet sind. GenScript hat die Methoden für Sekretion von rekombinanten Protein aus Baculovirus-infktierte Zellen gebahnt. Wir können Milligramm von rekombinantem Protein, das für funktionales Screening und biologische Prüfung mittels Reinigungsprozessen von entweder Kunden oder uns selber geeignet sind, produzieren. Unsere flexiblen Services haben große Kapazität. Wir sind fähig, bis zu 500 Liter pro Projekt zu produzieren.

GenScripts Spezialisten in Proteinexpression arbeiten eng mit Kunden zusammen, um rekombinante Volllänge-Protein zu klonieren und exprimieren aus Volllänge-cDNA, EST-Sequenz, und genomische Sequenzen. Wir bieten Services und Expertiese in alle Phase der Proteinexpression und -Produktion.

GenScripts Services für Baculovirus-Stock- und Insekt-Zellpellet-Präparation bieten garantierte Konsistenz von Batch-zu-Batch Virustiter an.

Vorteile von Baculovirus-Expression:

  • Klonierung des Gens (mit oder ohne Affinitäts-Tag) in einen kommerziell erhältlichen Expressionsvektor oder in einen Vektor des Kundens
  • Produktion der rekombinanten Viren mittels Bak-zu-Bak-System
  • Extraktion von viralen DNA
  • Amplifikation und Titration von dem hoch-titrigen rekombinanten Virus
  • Optimierung fremder Genexpression und der Proteinproduktion
  • Scale-up des Virus-Inoculums und Proteinproduktion in Suspension (Wave-Mixer bis zu 100 L und Schüttelkultur bis zu 10 L)
  • 15N- oder 13C-markierte Proteinexpression

Service-Spezifikationen:

ServicesBeschreibungLieferbaren
I. Generation von rekombinanten Bakmid-DNA
  • Amplifikation/Isolierung des gewünschten Gens und des synthetischen in den baculoviralen Expressionsvektor
  • Transformation des Expressionsklons in die DH10Bak-Zellen
  • Isolierung von rekombinanten Bakmid-DNA
  • Expressionsvektor mit Insert (5 ug)
  • Verifierte Sequenzdatei
  • Glycerolstock mit Vektor
  • Dokumentation von Prozeduren
II.Generation von dem niedrig-titrigen viralen Stock
  • Transfektion der Insekt-Zellen (Sf9,Sf21,Hi5) mit den rekombinanten Bakmid-DNA
  • Prüfung für Expression des rekombinanten Proteins mittels Western-Blot
  • Expressionsdaten
  • Plaque-gereinigte BV-Virusstock mit Titer
  • Dokumentation von Expressionsbedingung und -Analyse
III. Amplifikation von rekombinanten Baculovirus und Generation von dem hoch-titrigen viralen Stock
  • Generation von 10 - 200 ml von dem hoch-titrigen viralen Stock aus niedrig-titrigem Stock eines einzelnen rekombinantes
  • Bestimmung von Virus-Titer mittels qPCR
  • Bestätigung von Virus-Titer mittels Plaque-Assay
IV. Großmaßstäbliche Proteinexpression
  • Infektion der Insektzellen mit hoch-titrigen Virus-Stöcke
  • Posttransfektional Ernte von Insektzellen und Überstand
  • Zellpellet
  • Expressionsdaten
V. Proteinreinigung
  • Proteinreinigung mittels Hisx6-tag oder GST-tag, MBP-tag, DYKDDDDK-tag unter nativen oder denaturierenden Bedingungen
  • Identifikation des gereinigten Protein mitttels Western-Blot
  • Dialyse
  • Gereinigte Proteine
  • QS-Daten
  • Dokumentation von Prozeduren
VI. Extras
  • Tag-Entfernung mittels Reinigung mit Ionaustausch-Chromatographie, Gelfiltration, oder umgekehrte FPLC
  • Tag-freie Proteine
  • Dokumentation von Prozeduren

Angebotsanfrage und Bestellung:

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