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Ladekontrolle werden für zwei hauptsächlichen Zwecke in Western-Blot: 1) die relative Menge des in jede Spur geladenen gesamten Proteins zu schätzen (Diese Information ist notwendig zu bestimmen, wenn die unterschiedliche interessante Protein-Niveaus in verschiedenen Proben von Lade- und Transferfehler oder reale Veränderung in Proteinexpression verursacht werden. 2) Problembehandlung des Western-Blot-Verfahren. Es ist bekannt, dass die für Ladekontrolle benutzten Proteine in fast allen Gewerben und Zellen auf einem hohen Niveau konstitutiv und stabil exprimiert werden. Diese Proteine beinhalten Housekeeping-Proteinen wie GAPDH, Tubulin und Actin. Mit Stolz bietet GenScript eine große Auswahl an polyklonalen und monoklonalen Ladekontrolle-Antikörper für GAPDH, α-Tubulin, α-Actin, β-Actin für mehre Spezies an. HRP- und Biotin-konjugierte Versionen solcher Antikörper sind auch erhältlich.
Um Detektionsprozess der Ladekontrolle zu vereinfachen, bietet GenScript eine Serie von One-Step WesternTM Multiplex Kits an. Mit diesen Kits werden interessante Proteine und Ladekontrolle gleichzeitig mittels einem einfachen und nur eine Stunde dauernde Verfahren detektiert.
Beispiel:
Vergleich der Detektionsempfindlichkeit von Anti-β-Actin monoklonalen Antikörper aus GenScript und Unternehmen X
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Primäre Antikörper:
A. 0,1 μg/ml Maus Anti-β-Actin mAb (GenScript, A000702)
B. 0,1 μg/ml Maus Anti-β-Actin mAb (Unternehmen X)
Sekundäre Antikörper:
Ziege Anti-Maus IgG (H&L) [HRP] pAb (GenScript, 1:10.000, A00160)
Das Signal wurde mit LumisensorTM HRP Substrate Kit (GenScript, L00221V500) entwickelt.
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Produkt-Übersicht:
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