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Peptid-Modifikationen
( Peptide Modifications )

GenScript bietet mehrere Peptidmodifikations-Services an einschließlich, aber nicht beschränkt auf die folgenden:
Amidierung und Acetylierung Biotin und FITC Multiple Disulfidbindungen
Multiple Phosphorylierungen KLH, BSA, und Ovalbumin PEGylierung
Isotop-Markierung MAPs-Anwendung  

1. Amidierung und Acetylierung

Falls die Peptide aus einer internen Sequenz von Protein ist, wird die Ladung der terminalen Amidation (C-Terminus) oder Acetylation (N- Terminus) entfernt und es hilft, ihre natürliche Strukturen (Amide, CONH2) zu imitieren. Zusätzlich macht diese Modifikation die resultierte Peptide stabiler gegenüber einem enzymatischen Abbau, der von Exopeptidasen verursacht wird.

2. Biotin und FITC

Für C-terminale Labeling von Biotin, ist ein Lys-Rest zu C-Terminus der Peptide addiert. Biotin ist dann an der Lysin-Seitenkette via Amid-Bond gebunden. Die positive Ladung von Lysin ist dann entfernt.

Fluorescein isothiocyanate (FITC) ist eine aktivierte Vorstufe, die für Fluorescein-Labeling eingesetzt ist. Für effektive N-terminale Labeling ist ein Sieben-Atomen-Aminohexanoyl-Abstandstück (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) zwischen Fluorophor (Fluoroscein) und N-Terminus der Peptide eingefügt.

3. Multiple Disulfidbindungen

Peptidzyklisierung kann durch die Erzeugung der Disulfidbrücken zwischen Cystein-Rückständen des Peptids erfolgt werden. Dies ist wegen der zufälligen Formationen der Disulfidbrücken eine große Herausforderung für die Peptide, die multiplen Cystein-Rückstände enthalten. GenScript ist in der Lage, Disulfidbrücken zwischen Cysteinen an bestimmten Stellen zu bilden. Wir können bis zu drei benutzerdefinierte Disulfidbrücken auf einem Peptid einführen.

4. Multiple Phosphorylierungen

Phosphopeptide sind für die Untesuchung des Einfluss von Phosphorylation auf Peptid- und Protein-Strukturen und für das Verstehen der von Proteinkinasen gesteuerten reguratorischen Prozesse hilfreich. GenScript hat zahlreich Serin-, Threonin- und Tyrosin-Phosphopeptide erfolgreich synthetisiert. Für Peptide mit einer oder mehreren Hydroxyaminosäuren kann selektive Phosphorylation durch orthogonale Protektion oder durch Fmoc-geschutzte phosphorylierte Aminosäuren erreicht werden.

5. KLH, BSA, und Ovalbumin

Peptidantigene sind häufig zu klein um signifikante Immunreaktionen auf dieselbe zu erzeugen. Um diese Problem zu lösen, sind Peptide an größerem Transferprotein (Carrier-Protein) konjugiert, wie Bovine-Serum-Albumin(BSA), Ovalbumin oder Keyhole-Limpet-Hemocyanin(KLH). Ein der Vorteile von KLH ist es, dass es mit ELISA oder Western-Blotting nicht stört, da KLH als ein Blockierungsreagenz eingesetzt wird. Eine allgemeine Methode von Kunjugationsmethoden ist die Maleimide-Methode, mit der Cystein-Rest des Peptides mit Transferprotein (Carrier-Protein) verbindet. Um die Konjugation durchzuführen, ist ein Cystein-Rest zu die N- oder C-Ende des Peptides gebildet. Damit ist es möglich, mit Transferprotein (Carrier-Protein) zu verbinden.

Anmerkung: KLH ist ein großes (MW = 4*105 bis 1*107) aggregatiertes Protein. Wegen der Größe und der Struktur ist die Löslichkeit in Wasser oft limitiert. Es erzeugt eine negative Erscheinung von Lösung und Gemisch. Es beeinflusst die Immunogenität nicht und die trübe Lösung kann für Immunisierung verwendet werden.

6. PEGylierung

PEGylierung ist die kovalente Konjugation von Makromolekülen (Antikörper, Peptide usw.) mit Polyethylenglykol (PEG), die nichtionischen, ungiftigen, biokompatiblen und sehr hydrophilen Polymere sind. Die PEGylisierten Makromoleküle erhöhten die therapeutischen Eigenschaften aufgrund ihrer erhöhten Löslichkeit (für hydrophobe Arzneimittel) und Bioverfügbarkeit, die Antigenität für mindestens Immunantwort im Wirt maskiert, und längerer Kreislaufszeit im Wirt durch Verringerung der Nierenreinigung.

7. Isotop-Markierung

Für die NMR-Messung können wir Peptide mit stabilen und nonradioaktiven Isotopen markieren. Peptide, die mit 2H, 15N, 13C, oder beide 15N und 13C markiert werden, können für bequeme Detektion in der Forschung synthetisiert werden. Bitte geben Sie uns Ihre Sequenz und Antrag für eine kundenspezifische Markierung Ihrer Peptide.

8. MAPs-Anwendung

Anwendung von multiplen Peptidantigen (MAP) ist eine wirksame Methode, um Anti-Peptid-Antikörper mit Hochtiter und synthetischer Pepetide-Impfstoffe zu produzieren. Mit Nutzung der a- und e-Aminogruppe von Lysin bildet dieses System einen Rückgrat, an dem multiple Peptidkette gebunden werden. Durch die Lysine-Tieranzahl können Peptid-Seitenketten mit verschidenen Anzahlen synthetisiert. Es eliminiert die Notwendigkeit, Antigene auf einen Protein-Carrier zu konjugieren.

Lieferspezifikation:

Alle Peptidsynthesen sind GenScripts strenger Qualitätssicherung unterworfen. Die typische Lieferung besteht aus lyophilisierter Peptide von gewünschter Sequenz, Reinheit, und Qualität und relevanten Qualitätssicherungsberichten.

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