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custom recombinant protein service quotation

組み換えタンパク質受託生産サービス
( Custom Recombinant Protein Services)

GenScript社では遺伝子合成プロジェクトから蛋白質生産まで提供することができます。弊社無料提供の希少コドン分析ツールを用いて目的遺伝子配列を評価し、目標タンパク質の発現率を高めてください。

Custom Recombinant Protein Expression, Production Services Guaranteed protein expression package Large-scale Protein Production Services BioProcess Services E.coli Expression Yeast Expression Baculovirus Expression Mammalian Expression

"GenScript provides fast, professional protein synthesis services at very reasonable prices. By making it cost-effective to outsource protein production, GenScript has made it possible for my lab to focus on our own area of expertise and get more research done. The detailed planning, updates, and reports that GenScript provides all of the quality control that one could ask for. I strongly recommend GenScript's protein production service."

— Dr. Barry Bradford, Kansas State University Department of Animal Sciences & Industry


  • サービス項目
  • 技術的優位性
  • 成功例
  • 発表論文

1. Gene-to-Protein: 10 mgの可溶性精製タンパク質保証、$2,990より(Cat. No. SC1484)

パッケージ内容
納品物
納期
  • 遺伝子合成
  • サブクローニング
  • 発現条件最適化及び評価
  • 発現と精製
  • QCはSDS-PAGE、Western blot*、及びMALDI-TOF**によって行われます
  • pUC57ヘクロニーングされた遺伝子
  • 10 mgタグ付き可溶性精製タンパク質
  • QCデータ
4-8週間

2. 人気商品: タンパク質発現保証パッケージ――3mgの可溶性精製タンパク質を$2200より(Cat.NO. SC1253)

パッケージ内容
納品物
納期
  • サブクローニング
  • 発現条件最適化及び評価
  • 発現及び精製
  • QCはSDS-PAGE、Western blot*、及びMALDI-TOF**によって行われます
  • 3 mg以上のタグ付き可溶性精製タンパク質
  • QCデータ
4–5週間

3. BacPowerTM細菌発現系(Cat. No. SC1256)

仕様概要
納品物
納期
  • サブクローニング;発現条件評価及び最適化
  • SDS-PAGE とWestern-blot 解析
  • 一段階精製或いは多段階精製、タンパク質純度は75%から >95%
  • QCはSDS-PAGE、Western blot*、及びMALDI-TOF**によって行われます
  • タグ除去とエンドトキシン除去(オプション)
  • 可溶性精製タンパク質
  • QCデータ
4–6週間

4. YeastHIGHTM 酵母発現系(上級パッケージ: SC1346/ 標準パッケージ: SC1257)

仕様概要
納品物
納期
  • サブクローニング、組換え酵母ベクター作成
  • 多種類の宿主での発現条件評価及び最適化
  • 一段階精製或いは多段階精製
  • QCはSDS-PAGE、Western blot*、及びMALDI-TOF**によって行われます
  • 細胞ペレット或いは可溶性精製タンパク質
  • QCデータ
6–9週間

5. BacuVanceTMバキュロウイルス発現系 ( 最適化パッケージ : SC1347/標準パッケージ: SC1258)

仕様概要
納品物
納期
  • サブクローニング、組換えbacmid DNA及び高力価のウイルスストック作成
  • qPCR 或いはプラークアッセイ法を用いたウイルス力価の測定及び確認
  • 高力価のウイルスを昆虫細胞 (Sf9,Sf21,Hi5)に感染させる
  • 一段階精製或いは多段階精製
  • QCはSDS-PAGE、Western blot*、及びMALDI-TOF**によって行われます
  • 高力価ウイルスストック
  • 細胞ペレット/培地或いは精製された可溶性タンパク質
  • QC データ
6.5–8.5週間

6. 哺乳類動物細胞発現系 (Cat. No. SC1259/SC1260)

キャパシティー
納品物
納期
  • 融合タンパク質或いはtag-freeタンパク質
  • 安定発現細胞株3×3クローン
  • QCデータ
6–8週間/プロジェクトにより変動があります

* anti-His抗体及びanti-GST抗体で検出できるタグ付きタンパク質については、弊社ではWestern QCデータを無料で提供しています。その他のタグ付きタンパク質の場合は、追加費用を頂くこともあります。

** 追加料金でオプショナルMALDI-TOFデータを入手することも可能です。

  1. 遺伝子発現のためのOptimumGeneTM コドン最適化技術
GenScript社独自のOptimumGeneTM コドン最適化技術と遺伝子デザイン技術は目標タンパク質の発現レベルを大幅に向上させることができます。コドンの使用頻度と一部のmRNA構造のみ考慮していた伝統的な最適化方法と違い、弊社の最適化技術はmRNA全構造から評価しています。現在特許出願中のOptimumGeneTM 遺伝子デサイン技術は、タンパク質発現レベルを10倍以上上昇させることができます。実例はこちらから

2. 成功率及び組み換えタンパク質発現における幅広い経験 :
弊社は90%以上の成功率で膜タンパク質、分泌タンパク質、プロテアーゼ及び他の酵素などを含む数千個以上の難しいタンパク質をお客様に提供しました。我々が提供した組換えタンパク質は既にターゲット分子の評価、酵素特性解析、抗体作成、ハイスループットスクリーニング(HTS)、構造研究及び構造活性相関(SAR)などの研究に成功的に応用されてい ます。

3. BacPowerTM 技術及びFoldArtTM タンパク質リフォールディング技術
BacPowerTM 技術及びFoldArtTM タンパク質リフォールディング技術を用いて発現し難いあるいは溶け難いタンパク質の問題解決に取り組みます。

4.総括的サービス:
GenScriptでは遺伝子合成からタンパク質発現安定細胞株樹立抗体作製及びアッセイ開発までのサービスを提供することができます。

5. 高品質のサービス:
GenScriptでは高純度高活性及び早い納期などのご要求にお応えできる高品質のタンパク質発現サービスを提供しています。弊社では純度>95%、エンドトキシンレベル<0.01EU/ug のタンパク質を提供することができます。

1. Protein with biological activity:

Production and purification of proteins with biological activity is essential in drug discovery. Multifunctional units at GenScript secure successful delivery of bioactive proteins based on our state-of-the-art equipment and methodologies. A case study below shows groups of protein production and assay development teaming up to deliver enzyme with qualified specific activity, higher than customer expected. After modifying the method of cell-breaking, we increase the final yield of protein of interest with purity of above 90%.

Biological Activity Proteins
Fig.         A : SDS-PAGE analysis of the fractions upon the IEX chromatography
Lane 1-47: Gradient elution fractions
Lane      M: Low weight marker (GenScript, Cat. No. MM0906)
Lane      S: The supernatant after homogenizer with high pressure
Lane      ft : Flow through
Biological Activity Proteins
Fig.         B: Enzyme assay monitoring the fractionation by DEAD Sepharose
Biological Activity Proteins
Fig.       C: Fractions pooled based on activity analysis for further ADP Sepharose affinity purification
Fig.       D: SDS-PAGE analysis of the purified protein

Lane    M: Low weight marker (GenScript, Cat. No. MM0906)
Lane    S: The supernatant after homogenizer with high pressure
Lane    ft : Flow through

2. Protein refolding

Overproduction of proteins in E.coli can cause the formation of inactive, misfolded and insoluble protein aggregates. GenScript provides proprietary refolding technology to solve this problem. A case study shows that over 95% of the inclusion body is solublized and refolded. The purity of the refolded protein is more than 85%. The refolded protein is delivered in customized buffer.

Protein Refolding
Fig. Refolded protein of sample was analyzed by SDS-PAGE followed by Coomassie Brilliant Blue staining
Lane M: Smart Protein Standard (GenScript, Cat. No. MM0900)
Lane 1: Refolded protein of sample

3. Tag removal

Presence of epitope tag in recombinant proteins may result in changes in protein structure, toxicity, and loss of bioactivity. To avoid these problems, tag removal after protein expression is one of additional requests from some customers. Shown below is protein that is cleaved by SUMO protease and successfully isolated. About 80% tag free target protein with purity of >90% is recovered.

Tag removal
SDS-PAGE checking purification of protein after tag cleavage by SUMO protease
Fig.    A:
Lane M: Smart Protein Standard (GenScript, Cat.No. MM0900)
Lane  1: Refolded fusion protein with SUMO-tag
Fig.    B:
Lane M: Smart Protein Standard (GenScript, Cat.No. MM0900)
Lane  1: Recovered protein after 1st incubation with Ni-resin
Lane  2: Recovered protein after 2nd incubation with Ni-resin
Lane  3: Elute with 300 mM imidazole from Ni-resin of 2nd incubation

弊社のタンパク質サービスをご利用なさった発表論文の一部

  • Youngjin Park, Mohd Amir F. Abdullah, Milton D. Taylor, Khalidur Rahman, and Michael J. Adang. Enhancement of Bacillus thuringiensis Cry3Aa and Cry3Bb toxicities to coleopteran larvae by a toxin-binding fragment of an insect cadherin. Appl. Envir. Microbiol. May 2009; 75(10): 3086-3092

  • Ilene M. Pedroso, William Hayward, and Terace M. Fletcher. The effect of the TRF2 N-terminal and TRFH regions on telomeric G-quadruplex structures. Nucleic Acids Res. Apr 2009; 37(5): 1541-1554

  • Huiyong Wei, Dan Huang, Jeff Fortman, Richard Wang, Linyun Shao, and Zheng W. Chen. Coadministration of Cidofovir and Smallpox Vaccine Reduced Vaccination Side Effects but Interfered with Vaccine-Elicited Immune Responses and Immunity to Monkeypox. J. Virol. Jan 2009; 83(2): 1115 - 1125

  • Ashish Nagarsekar, Rachel S. Greenberg, Nirav G. Shah, Ishwar S. Singh, and Jeffrey D. Hasday. Febrile-Range Hyperthermia Accelerates Caspase-Dependent Apoptosis in Human Neutrophils. J. Immunol. Aug 2008; 181(4): 2636 - 2643

  • Brando C, Ware LA, Freyberger H, Kathcart A, Barbosa A, Cayphas S, Demoitie MA, Mettens P, Heppner DG, Lanar DE. Murine immune responses to liver-stage antigen 1 protein FMP011, a malaria vaccine candidate, delivered with adjuvant AS01B or AS02A. Infect. Immun. Feb 2007; 75(2): 838-845

  • Buchko GW, Ni S, Robinson H, Welsh EA, Pakrasi HB, Kennedy MA. Characterization of two potentially universal turn motifs that shape the repeated five-residues fold--crystal structure of a lumenal pentapeptide repeat protein from Cyanothece 51142. Protein Sci. Nov 2006; 15(11): 2579-2595

  • Dieterich DC, Link AJ, Graumann J, Tirrell DA, Schuman EM. Selective identification of newly synthesized proteins in mammalian cells using bioorthogonal noncanonical amino acid tagging (BONCAT). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Jun 2006; 103(25): 9482-9487

より多くの発表論文はこちらから

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