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Western blotでローディング・コントロールを必要とする二つの理由は1）それぞれのレーンのタンパク質のローディング量を評価（この情報はそれぞれのサンプルの中のタンパク質発現量の差がローディングまたは転写による誤差ではないことを証明するのに必要です。）2）Western blotting作業で起きた問題を解決する。ローディング・コントロールとして使われるタンパク質は、ほとんどすべての組織と細胞で持続的且つ安定的に発現するもので、GAPDH, tubulin, actinなどのハウスキーピング・タンパク質が含まれています。GenScriptは何種類のGAPDH, α-tubulin, α-actin, β-actinに対する幅広いポリクローナル、モノクローナルローディング・コントロール抗体を提供することを誇りに思っています。HRP- 及びbiotin-結合抗体も入手できます。
ローディング・コントロール検出プロセスを簡単にするため、弊社では一連のONE-HOUR WesternTM Multiplex Kitsを提供しています。これらのキットは目的タンパク質検出とローディング・コントロールを同時に1時間で完成させます。
例:
GenScript社とX社のAnti-β-Actinモノクローナル抗体検出感度の比較結果
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一次抗体:
A. 0.1 μg/ml Mouse Anti-β-Actin mAb (GenScript, A000702)
B. 0.1 μg/ml Mouse Anti-β-Actin mAb (Company X)
二次抗体:
Goat Anti-Mouse IgG (H&L) [HRP] pAb (GenScript, 1:10,000, A00160)
The signal was developed with LumisensorTM HRP Substrate Kit (GenScript, L00221V500)
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製品概要:
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