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El Sistema de Vector de Expresión de Baculovirus
(BEVS) es reconocido universalmente como una herramienta poderosa y
versátil para la producción de grandes cantidades de proteínas
recombinantes debido a su facilidad de uso, alto nivel de expresión, y
habilidad de incorporar modificaciones postranslacionales. El paquete
del servicio de expresión de baculovirus de GenScript incluye la
producción de virus y la producción de proteína a gran escala, apto
para industrias farmacéuticas y biotecnológicas e institutos
académicos. GenScript ha sido pionero en los métodos para la secreción
de proteínas recombinantes de células de insectos infectadas por
baculovirus. Podemos producir cantidades de miligramos de proteína
recombinante, adecuada para screening funcional y prueba biológica
usando los procesos de purificación del cliente o nuestros propios.
Nuestros servicios flexibles tienen la considerable capacidad de
ampliación: Se pueden producir hasta 500 litros por proyecto.
Los especialistas de expresión de proteína de GenScript trabajan en
estrecha colaboración con los clientes para clonar y expresar largas
proteínas recombinantes de cDNAs de larga duración, información de
secuencia de EST, y secuencias genómicas, proporcionan servicio y
experticia en todas las etapas de expresión y producción de proteínas.
Ventajas de Expresión de Baculovirus:
- Clonación del gene (con o sin etiquetados de afinidad) en un vector de expresión
disponible en comercio o un vector hecho a la medida
- Producción de virus recombinantes usando el sistema Bac-a-Bac
- Extracción de DNA viral
- Amplificación y titulación de virus recombinante de alto título
- Optimización de expresión de gene del exterior y producción de proteína
- Ampliación de vacunas de virus y producción de proteína en suspensión (mezclador
de onda hasta 100 L y cultivos agitados hasta 10 L)
- Expresión de proteína 15N- o 13C-etiquetada
Especificaciones de Servicios:
| Servicios |
Descripción |
Entregables |
| I. Generación de bacmid DNA recombinante |
- Amplificación/aislamiento del gene o gene sintético de interés en un vector de expresión baculoviral
- Transformación de la clonación de expresión en células DH10Bac
- Aislamiento de bacmid DNA recombinante
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- Vector de expresión con insertos (5 ug)
- Fila de secuencia verificada
- Stock de glicerol con vector
- Documentación de procedimientos
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| II. Generación de stock viral de bajo título |
- Transfección de células de insectos (Sf9,Sf21,Hi5) con el bacmid DNA recombinante
- Pruebas para expresión de la proteína recombinante por western blot
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- Datos de expresión
- Stock de virus BV placa purificada con título
- Documentación de condición de expresión y análisis
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| III. Amplificación de baculovirus recombinante y generación de stock viral de alto título |
- Generación de 10 - 200 ml de stock viral de alto título desde el stock de bajo título de un singular recombinante
- Determinación de título de virus usando qPCR
- Confirmación de título de virus por ensayo de placa
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| IV. Expresión de proteína a gran escala |
- Infección de células de insectos con stocks de virus de alto título
- Cosecha postransfeccional de células de insectos y sobrenadando
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- Pellet celular
- Datos de expresión
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| V. Purificación de proteína |
- Purificación de proteína usando Hisx6-tag o GST-tag, MBP-tag, DYKDDDDK-tag en condiciones nativas o desnaturalizadas
- Identificación de proteína purificada por western blot
- Diálisis
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- Proteínas purificadas
- Datos de CC
- Documentación de procedimientos
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| VI. Extras |
- Remoción etiquetada seguida de purificación con cromatografía de intercambio iónico, filtración del gel o FPLC reverso
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- Proteínas sin etiqueta
- Documentación de procedimientos
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Cotización y Pedido:
Para solicitar una cotización, por favor, descargue y complete el Formulario de Cotización/Pedido, y envíenoslo por email o fax.
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Si presente muestras, por favor, envíelas juntos con una copia dura del completo Formulario de Cotización/Pedido a: Protein Services, GenScript, 120 Centennial Ave., Suite 105, Piscataway, NJ 08854, US.
Por las preguntas, o para solicitar las informaciones del estado de su pedido, puede ponerse en contacto con nosotros por email, teléfono, fax o a través de nuestro seguro web servidor.
Nuestros representantes del servicio al cliente están disponibles las 24 horas de lunes a viernes para ayudarle.
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Pedir y Cotizar por email: order@genscript.es |
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Pedir por teléfono: +1-732-885-9188 (EE.UU.)
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